組織搗碎勻漿機(jī)關(guān)于組織勻漿的制備講解

　　1.取組織塊（0.2g-1g）少可到2-5mg，在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，稱重，放入5或10ml的小燒杯內(nèi)

　　2.用移液管量取預(yù)冷的勻漿介質(zhì)或者用0.86％冷生理鹽水，勻漿介質(zhì)或生理鹽水的體積總量應(yīng)該是組織塊重量的9倍，用移液管或移液器取總量的2/3的勻漿介質(zhì)或生理鹽水于燒杯中，用眼科小剪盡快剪碎組織塊。

　　3.勻漿的方式有多種：手工勻漿、機(jī)器（JJ-2組織搗碎勻漿機(jī)）勻漿、超聲勻漿、反復(fù)凍融。

　　手工勻漿：將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中，再將剩余的1/3勻漿介質(zhì)或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊，一起倒入勻漿管中進(jìn)行勻漿，左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次（6-8分鐘），充分研碎，使組織勻漿化。

　　機(jī)器勻漿：用JJ-2組織搗碎勻漿機(jī)研磨制成10％組織勻漿，也可用內(nèi)切式組織勻漿機(jī)制備（勻漿時(shí)間10秒/次，間隙30秒，連續(xù)3-5次，在冰水中進(jìn)行），皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時(shí)間。

　　超聲粉碎：用超聲粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，可用超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細(xì)胞破碎。

　　反復(fù)凍融：培養(yǎng)或者分離的細(xì)胞可以用以上的方法勻漿，也可以反復(fù)凍溶3次左右（即讓細(xì)胞加適量的低滲液或者雙蒸水放低溫冰箱中結(jié)冰，溶解，再結(jié)冰，再溶解，反復(fù)3次左右），但有部分酶活力會受影響。

　　取少量組織勻漿做涂片（直接涂片、染色均可），顯微鏡下觀察細(xì)胞是否磨破，若沒有破則可以延長勻漿時(shí)間或增加凍融次數(shù)。

　　4.將制備好的10％勻漿用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)3000r/min左右離心10-15分鐘，若檢測ATP酶，則只需要1000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘，將離心好的勻漿留下上清棄下面沉淀。

　　根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清液進(jìn)行各種測定。